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HPLC溶劑選擇中的關(guān)鍵考慮因素

更新時(shí)間:2021-11-30      點(diǎn)擊次數(shù):1959

選擇用作HPLC分析流動(dòng)相的溶劑是色譜分析過程的關(guān)鍵步驟。到現(xiàn)在為止,沒有一種能夠滿足所有分析需求的通用溶劑,而且根據(jù)分析要求所使用的溶劑組合會(huì)變得更多。選擇合適的溶劑是根據(jù)其物理性質(zhì)以及與樣品、色譜柱固定相的相容性。

流動(dòng)相溶劑選擇的一般要求是:溶劑應(yīng)當(dāng)是高純度,溶劑與固定相不互溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性,建議使用純水或者液相色譜專用的溶劑;溶劑的性能與使用的檢測器應(yīng)當(dāng)匹配;溶劑對樣品應(yīng)有足夠的溶解能力,樣品要*溶于流動(dòng)相。如果有不溶的樣品將導(dǎo)致流動(dòng)相分離或懸浮,會(huì)導(dǎo)致后續(xù)一系列的操作問題;溶劑應(yīng)具有低的粘度和適當(dāng)?shù)偷姆悬c(diǎn);盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑。

除此之外本文還討論了選擇合適的流動(dòng)相溶劑的一些其他重要的考慮因素。

成本

成本是一個(gè)重要的考慮因素,因?yàn)?span style="font-size: 19px;">HPLC需要高純度等級(jí)的溶劑,特別在大型實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)常看到數(shù)十個(gè)HPLC系統(tǒng)全天候運(yùn)行。這意味著每天會(huì)大量消耗高純度的溶劑,因此成本方面的考慮至關(guān)重要。想要既符合實(shí)驗(yàn)要求又價(jià)格比較實(shí)惠的溶劑,很多時(shí)候都不能同時(shí)滿足。如果這個(gè)時(shí)候溶劑還沒有充分使用,造成浪費(fèi),就更得不償失了。

恒譜生2μ,5μ,10μ,20μm入口溶劑過濾器吸濾頭,不會(huì)將空氣引入系統(tǒng),無氣泡進(jìn)入流動(dòng)相管路,儲(chǔ)液瓶溶劑抽取利用率可達(dá)99%以上,大大減少瓶底溶劑因無法凈真空吸取而造成的浪費(fèi)。

恒譜生溶劑吸濾頭.png

 

吸光度

通常,HPLC中使用的檢測器基于樣品成分對光的吸收。在選定的波長范圍內(nèi),流動(dòng)相成分的固有吸光度不能干擾樣品的吸光度。理想情況下,流動(dòng)相溶劑在目標(biāo)波長范圍下沒有吸收光線是好的。

揮發(fā)性

流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低揮發(fā)性。高揮發(fā)性溶劑可能導(dǎo)致流動(dòng)相組成在使用和存儲(chǔ)過程中發(fā)生變化,這會(huì)導(dǎo)致色譜圖的重現(xiàn)性很差。

    黏度

所選的溶劑應(yīng)具有低粘度讓流過色譜柱的流體不會(huì)產(chǎn)生高背壓。色譜柱背壓形成的原因有很多,樣品的易吸附機(jī)制也可能會(huì)和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。如果有顆粒物堵塞柱頭也會(huì)導(dǎo)致色譜柱背壓升高。為了防止色譜柱背壓升高,我們可以選擇在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器,在線溶劑過濾器安裝在液相泵和進(jìn)樣器之間,能夠去除溶劑中的顆粒物,避免它們進(jìn)入進(jìn)樣器,從而防止堵塞。HPLC技術(shù)對到達(dá)檢測器的流動(dòng)相的組成非常敏感,因此必須通過在線過濾器除去溶劑里的固體懸浮液。脫氣也是去除任何少量溶解空氣的必要條件,否則會(huì)導(dǎo)致流量限制或雜散峰。

恒譜生不銹鋼在線過濾器安裝在泵的出口和進(jìn)樣閥之間,采用濾杯式結(jié)構(gòu)受液面積大,使用壽命長,既可有效的防止顆粒進(jìn)入系統(tǒng),又能保證足夠的液流。恒譜生液相超高壓在線過濾器色譜耗材配件抗腐蝕性好;清洗或更換簡便;不易堵塞,壽命產(chǎn)品;死體積少,不漏液,低背壓,有多種規(guī)格可供選擇。

 

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惰性

所選溶劑應(yīng)對樣品組分,色譜柱填充物和色譜柱材料呈惰性。如果與這些成分中任何一種有反應(yīng)性都可能導(dǎo)致形成沉淀物,氣體或其他反應(yīng)產(chǎn)物,從而破壞系統(tǒng)性能。溶劑與樣品接觸后不應(yīng)形成單獨(dú)的相。換句話說,應(yīng)該與溶劑*混溶。

恒譜生科學(xué)儀器有限公司是致力于研發(fā)制造高質(zhì)量色譜耗材配附件的高科技生產(chǎn)廠家,我們在無氣泡較高凈化能力的溶劑進(jìn)樣過濾器、超高壓在線過濾器、較少死體積色譜保護(hù)柱與卡套、0.1微米高光潔度色譜柱柱管、鬼峰去除柱、管路接頭等領(lǐng)域具有十多年豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和較強(qiáng)大的制造技術(shù)能力。


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